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人乳头状瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关,抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV,从而及时监控宫颈癌的发生,以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程,请据图回答:

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解决时间 2021-02-14 00:14
人乳头状瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关,抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV,从而及时监控宫颈癌的发生,以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程,请据图回答:

(1)单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有 。
(2)若要分析杂交瘤细胞中染色体,可通过  等过程制成装片,然后在显微镜下观察。杂交瘤细胞中染色体数目与普通淋巴细胞相比具有的特点是  ,在HAT培养基上存活的细胞可能包括  (填下列序号)。①无抗体分泌的细胞 ②抗HPV抗体的分泌细胞③其它无关抗体的分泌细胞
(3)对于抗体检测呈  性的杂交克隆应尽早进行克隆化,克隆化的方法最常用的是有限稀释法,即稀释细胞到3~l0个细胞/mL,每孔加入细胞稀释液  mL(0.1/1/10),使每个孔内不多于一个细胞,达到单克隆培养的目的。
(4)由上述过程生产出的单克隆抗体不能直接用于人体,理由是  。
(5)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因(prG),该基因能激发动物细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。除本题描述的一种制备单克隆抗体技术外,请再简要写出一种制备单克隆抗体的思路  。
最佳答案
(答案→) 解析:(1)单克隆抗体制备过程中要将淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞,为动物细胞融合技术,要培养杂交瘤细胞,为动物细胞培养技术。(2)观察细胞染色体制片流程:解离、漂洗、染色和制片。杂交瘤细胞具有无限增殖能力,观察到的染色体数目往往增倍,而普通淋巴细胞高度分化,能够产生抗体,不再分裂,染色体数目不增倍。杂交瘤细胞不能在HAT培养基上存活,故其他类型融合细胞可以生存,即骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞的融合细胞,能够产生抗HPV抗体淋巴细胞与能够产生抗HPV抗体淋巴细胞融合细胞,不能够产生抗HPV抗体淋巴细胞与不能够产生抗HPV抗体淋巴细胞的融合细胞,故①②③都能生存。(3)检测后能够产生抗HPV抗体即抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞要行克隆化,以便产生单克隆抗体。有限稀释法因为稀释细胞到3~l0个细胞/mL,故每孔加入细胞稀释液0.1 mL,,使每个孔内不多于一个细胞,达到单克隆培养的目的。(4)因为小鼠形成的抗体对人体来说是抗原,存在着排异反应,故由上述过程生产出的单克隆抗体不能直接用于人体。(5)据题意,可以通过基因工程向浆细胞细胞核染色体DNA中导入prG,提取该浆细胞细胞核,和去核的无限增殖细胞融合为重组细胞,进行细胞培养产生单克隆抗体。
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