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PCR技术是一种DNA的扩增技术,操作步骤简介如下:第一步:准备反应式溶液和模块DNA。A配制聚合酶链式反应溶液:配方:按如下比例进行配制:蒸馏水100、缓冲溶液15、氯化镁溶液

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解决时间 2021-03-11 05:31
PCR技术是一种DNA的扩增技术,操作步骤简介如下:
第一步:准备反应式溶液和模块DNA。
A.配制聚合酶链式反应溶液:
配方:按如下比例进行配制:蒸馏水100、缓冲溶液15、氯化镁溶液8、引物13、引物23、DNA聚合酶、矿物油1(防止聚合酶在冻结时受伤害);dATP、dGTP、dCTP、dTTP每一种各加5。
B.准备要拷贝的DNA:
提取准备要拷贝的DNA
(如可以用一牙签轻刮口腔内壁,将牙签放入蒸馏水中摇动。加热蒸馏水沸腾,使细胞破碎放出DNA。用离心机离心后,去除蒸馏水中较大的细胞碎片。这时上清液中就有了较纯的DNA。)
第二步:聚合酶链式反应。
①将要拷贝的DNA“B”放入反应液“A”中。
②水浴加热。首先,94 ℃,使DNA双螺旋解旋,历时1 min;然后,56 ℃,使引物结合到DNA上,历时90 s;最后,72 ℃,用聚合酶使DNA拷贝,历时90 s。③重复步骤②。每重复一次,即完成一次拷贝。
分析回答下列问题:
(1)以上材料可以说明
A.DNA的复制必须在活细胞内才能完成
B.DNA能指导蛋白质的合成
C.在合适的条件下,非细胞环境也能进行DNA复制
D.PCR技术是一种无性生殖技术
(2)为什么要加入两种引物。

引物的作用是什么?

(3)PCR技术中用到的DNA聚合酶,取自生长在温泉中的一种细菌,就PCR技术来讲,你认为使用这种细菌中提取的酶较普通的动植物体内提取的DNA聚合酶的优势是
。C (2)DNA分子两条链是呈反向平行的,DNA聚合酶不能从头合成DNA分子,只能从3’端到5’端延伸,而引物也是一段核苷酸序列,与DNA分子双链中的一条链互补可以引导DNA分子的复制
最佳答案
(答案→)C (2)DNA分子两条链是呈反向平行的,DNA聚合酶不能从头合成DNA分子,只能从3’端到5’端延伸,而引物也是一段核苷酸序列,与DNA分子双链中的一条链互补可以引导DNA分子的复制 解析:(1)PCR说明在体外也能将DNA进行大量复制,故选C。(2)PCR过程DNA聚合酶的作用是将游离的脱氧核苷酸加到DNA片段上,不能从头合成DNA分子,故必须需要一段引物,引物是一段核苷酸序列,与DNA分子双链中的一条互补链互补,可以引导DNA分子的复制。(3)PCR因为需要在高温下变性,这种酶耐高温,与普通酶相比在较高温下不会变性失活。
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