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高中生物,基因工程。 谁能给我讲讲怎么用DNA分子杂交技术检测目的基因?

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解决时间 2021-02-15 15:13
高中生物,基因工程。 谁能给我讲讲怎么用DNA分子杂交技术检测目的基因?
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先从基因文库中构建目的基因然后导入受体细胞,用DNA分子探针进行杂交鉴定,看有没有分子杂交带。
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书上有现成的啊!
献给你说检测基因的有无 高中水平你知道基因是一段具有生物学功能的dna序列就可以了,什么叫生物学功能呢?就是可以翻译成为具有功能的蛋白质,或者转录为具有功能的rna(比如trna,功能就是携带氨基酸) 那么基因的本质是dna(rna病毒除外),即一段特定的dna序列,比如attggc…… 检测有没有目的基因,你需要先知道 目的基因的序列,然后体外合成扩增或用其他手段获得这样一段特定的dna序列的互补序列如上例就是5‘gccaat3’,然后将你需要检测的样本的dna提取出来,在然后用你准备好的互补序列去和你的提取样本放在一起退火(意思是可以互补的单链dna回复双链)你可以给你的探针上的磷用同位素标记,当你退火一段时间,冲洗样本,将没有配对的探针洗去,检测样本有没有磷同位素标记,如果有,说明探针和目的基因互补配对了,说明目的基因存在如果没有,说明不存在目的基因,就这样. 其实原理就是碱基互补配对。 检测目的基因的翻译,我想你要说的其实是转录吧! 我假设你要检测的翻译蛋白质的基因的转录,那转录物就是mrna,高中的知识应该告诉你了,mrna(真核)3‘端具有多聚a的尾巴,那么我用多聚t的探针(探针另一头我可以连接在一个固定物体上)去和细胞中的mrna配对,然后将细胞内所有的mrna都抽提出来(因为是aaaaaaa和tttttt配对,没有特异性,注意前面的探针是具有特异性的)这个时候,你有两种选择:1.用目的基因的探针直接和mrna配对来检测 2.将mrna逆转录会cdna,然后在用探针检测 个人觉得2方案更好,因为逆转录以后可以pcr扩增,这样大量探针和大量的目的基因杂交,如果能配对,信号强易检测,置信度大。 就是这样,纯原创。
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