分离与鉴定蛋白质已知植物叶绿体中的蛋白A分子量为72KD,由393个氨基酸组成,具有两个相同的亚基,

分离与鉴定蛋白质已知植物叶绿体中的蛋白A分子量为72KD,由393个氨基酸组成,具有两个相同的亚基,

1.破碎细胞（简单 自己查资料）2.提取纯化叶绿体（简单 自己查资料）3.用pH 8.25 缓冲液 破碎叶绿体4.离心去除沉淀（沉淀含有蛋白B）收集上清液（含有蛋白A）5.缓慢调解上清液pH 到6.8-6.9,离心 收集沉淀（含有蛋白A）6.用pH 到6.8-6.9的缓冲液洗涤沉淀.离心收集沉淀.7.最后溶解于pH 7.6-7.8 的 比如pBS 中8.鉴定 SDS-PAGE （加2mer 等还原剂）,电泳 观察条带数目和分子量======以下答案可供参考======供参考答案1:大小一样，跑电泳肯定是不行了！不知道还有没有其他的区别？蛋白质、多肽均属于两性电解质，在缓冲液pH小于其等电点时，带净正电荷，而在缓冲液pH大于其等电点时，带净负电荷。阳离子交换凝胶本身带负电荷基团。由于静电相互作用而使样品结合到凝胶上，再更换缓冲液的pH值进行洗脱就目前给出的条件，采用阳离子交换色谱，酸性条件下挂柱。更换缓冲液的pH(本实验设置在7-8之间）值进行洗脱。供参考答案2:进行双向电泳分析