细胞筛选有哪些方法
答案:1 悬赏:40 手机版
解决时间 2021-02-06 17:21
- 提问者网友:听门外雪花风
- 2021-02-05 16:31
细胞筛选有哪些方法
最佳答案
- 五星知识达人网友:山君与见山
- 2021-02-05 17:23
我听说过有限的几种,其他请网友补充。
关键看要根据细胞的什么性质来筛选。
最简单的,根据大小,则可用细胞过滤网。
根据贴壁特性,只要使用贴壁类型的培养皿,就可以分离贴壁和悬浮类型的细胞。使用胰酶快速消化,则可以分离贴壁能力较强和较弱的细胞。
根据对特定生长因子的需求,也可以用特别的培养液配方来筛选细胞。
比较高科技较为精确的,即根据单一特定蛋白质的表达来筛选细胞,我听说过三种方法:
1。用基因转染方式把抗药性基因引入细胞,并确定抗药性基因跟需要筛选的目标基因受同样的启动子调控。然后将相应的药物加入到培养基,则不表达目标基因和抗药性基因的细胞将全部被药物杀死,达到筛选的目的。
2。用流式细胞仪。如果目标蛋白本身是荧光蛋白,可以直接筛选。否则的话,使用荧光标记的抗体染色以后筛选。
3。用磁性细胞分选仪。原理同2类似,只不过识别目标蛋白的抗体是偶联在微小的磁珠上面,而分离过程使用磁柱来吸附与磁珠相结合的细胞。
关键看要根据细胞的什么性质来筛选。
最简单的,根据大小,则可用细胞过滤网。
根据贴壁特性,只要使用贴壁类型的培养皿,就可以分离贴壁和悬浮类型的细胞。使用胰酶快速消化,则可以分离贴壁能力较强和较弱的细胞。
根据对特定生长因子的需求,也可以用特别的培养液配方来筛选细胞。
比较高科技较为精确的,即根据单一特定蛋白质的表达来筛选细胞,我听说过三种方法:
1。用基因转染方式把抗药性基因引入细胞,并确定抗药性基因跟需要筛选的目标基因受同样的启动子调控。然后将相应的药物加入到培养基,则不表达目标基因和抗药性基因的细胞将全部被药物杀死,达到筛选的目的。
2。用流式细胞仪。如果目标蛋白本身是荧光蛋白,可以直接筛选。否则的话,使用荧光标记的抗体染色以后筛选。
3。用磁性细胞分选仪。原理同2类似,只不过识别目标蛋白的抗体是偶联在微小的磁珠上面,而分离过程使用磁柱来吸附与磁珠相结合的细胞。
我要举报
如以上问答信息为低俗、色情、不良、暴力、侵权、涉及违法等信息,可以点下面链接进行举报!
大家都在看
推荐资讯