(13分)Ⅰ如图表示运用基因工程技术生产胰岛素的三条途径。据图结合所学知识回答下列问题：(1)为了便于将含有目的基因的细胞筛选出来，所选择的质粒上应该具有。(2)培育转基因羊的过

(13分)Ⅰ．如图表示运用基因工程技术生产胰岛素的三条途径。据图结合所学知识回答下列问题：

(1)为了便于将含有目的基因的细胞筛选出来，所选择的质粒上应该具有 。
(2)培育转基因羊的过程中，科研人员通过感染或 技术将重组质粒M转移到受体细胞A中，受体细胞A应该是 细胞。③过程中还用到了 技术。
(3)受体细胞B应该是莴苣的 (填“体细胞”“卵细胞”或“受精卵)，导入该细胞后，需对该细胞进行培养，经 过程形成愈伤组织。
(4)莴苣为双子叶植物，过程②常用的方法是 ；过程⑥常用的方法是用 来处理大肠杆菌，使其易于吸纳重组质粒M。
Ⅱ、下图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别位点，Apr表示抗青霉素的抗性基因，Tcr表示抗四环素的抗性基因。

(1)将两端用E1切开的APr基因与用E1切开的质粒X-1混合连接，连接后获得的质粒类型有 （2分）。(可多选)A．X-1B．X-2C．X-3D．X-4(2)若将上图所示X-1、X-2、X-3、X-4四种质粒导入大肠杆菌，然后分别涂布在含有青霉素或四环素的两种培养基上。在四环素的培养基不能生长的大肠杆菌细胞类型有 、 、 。Ⅰ（1）标记基因 （2）显微注射 受精卵 动物细胞培养、胚胎移植

(答案→)Ⅰ（1）标记基因 （2）显微注射 受精卵 动物细胞培养、胚胎移植 解析：试题分析：Ⅰ、(1)质粒作为载体一般具有三个条件：有复制原点、有目的基因插入点、有标记基因。标记基因可以是抗生素抗性基因、荧光标记基因等，它有利于目的基因的检测。(2)在动物基因工程中，可利用显微注射法将重组质粒导入到受精卵细胞中，因为受精卵比较大，易操作，并且受精卵的全能性高。受精卵可以用早期胚胎培养培养到桑椹胚或者囊胚，在通过胚胎移植技术导入到受孕母羊体内。(3)植物基因工程中，一般利用体细胞作为受体细胞，然后利用植物组织培养技术首先进行脱分化形成愈伤组织，然后再进过再分化形成胚状体进而发育成完整植株。(4)双子叶植物一般利用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞。当受体细胞是细菌时，常用Ca2+处理，得到感受态细胞，此时细胞壁和细胞膜的通透性增大，容易吸收重组质粒。Ⅱ、（1）用E1切开的质粒X－1后，该质粒不含APr基因，因此APr基因与用E1切开的质粒X－1混合后，可能有三种结果，APr基因自身环化、质粒X－1自身环化（X-3）、APr基因和质粒X－1重新组合（X-1），有自身环化连接形成的X-1、X-3，故选A、C。（2）Tcr表示抗四环素的抗性基因，因此质粒中含有Tcr基因的导入大肠杆菌中，大肠杆菌不死亡，即图中X-2和X-4两种质粒，因此无质粒细胞、含X-1的细胞、含X-3的细胞均不能生长。考点：本题考查了基因工程的相关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的能力；从题目所给的图形中获取有效信息的能力。

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