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求助,如何设计长片断的PCR引物和选取适当质粒

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解决时间 2021-04-04 00:32
求助,如何设计长片断的PCR引物和选取适当质粒
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如果你的意思是如何对插入片段/基因筛选的话,可以考虑使用有LacZ/蓝白斑筛选性质的载体。如果没有合适的载体可以用菌落PCR的方法,设计PCR引物在载体插入位点2边各约100bp以内(常用引物的多克隆位点两侧一般有通用引物区域),在转化之后的培养基上挑取单克隆少量菌体为模版进行PCR,如果包含长入片段则PCR产物大小为引物距插入位点的距离加上插入片段的大小,否则则只有小于200bp的载体自连扩增片断
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