【酵母菌培养】求酵母菌液体培养基配方!

【酵母菌培养】求酵母菌液体培养基配方!

【答案】 (一)麦芽汁培养基的配制
　　1．培养基成分
　　新鲜麦芽汁一般为10-15波林.
　　2．配制方法
　　(1)用水将大麦或小麦洗净,用水浸泡6-12h,置于15℃阴凉处发芽,上盖纱布,每日早、中、晚淋水一次,待麦芽伸长至麦粒的两倍时,让其停止发芽,晒干或烘干,研磨成麦芽粉,贮存备用.
　　(2)取一份麦芽粉加四份水,在65℃水浴锅中保温3-4h,使其自行糖化,直至糖化完全(检查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如无蓝色出现,即表示糖化完全).
　　(3) 糖化液用4-6层纱布过滤,滤液如仍混浊,可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清,加水20 m1,调匀至生泡沫,倒入糖化液中,搅拌煮沸,再过滤).
　　(4)用波美比重计检测糖化液中糖浓度,将滤液用水稀释到10-15波林,调pH至6．4.如当地有啤酒厂,可用未经发酵,未加酒花的新鲜麦芽汁,加水稀释到10-15波林后使用.
　　(5)如配固体麦芽汁培养基时,加入2％琼脂,加热融化,补充失水.
　　(6)分装、加塞、包扎.
　　(7)高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min.
　　（二)马铃薯葡萄糖培养基的配制
　　1、培养基成分
　　马铃薯 20g
　　葡萄糖 2 g
　　琼脂 1.5-2g
　　水 100ml
　　自然pH
　　2．配制方法
　　(1)配制20％马铃薯浸汁 取去皮马铃薯200g,切成小块,加水1000m1.80℃浸泡lh,用纱布过滤,然后补足失水至所需体积.100 Pa灭菌20 min.即成20％马铃薯浸汁,贮存备用.
　　（2)配制时,按每100 m1马铃薯浸汁加入2g葡萄糖,加热煮沸后加入2g琼脂,继续加热融化并补足失水.
　　(3)分装、加塞、包扎.
　　(4)高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min.
　　(三)豆芽汁葡萄糟培养基的配制
　　1．培养基成分
　　黄豆芽 10g
　　葡萄糖 5g
　　琼脂 1.5-2g
　　水 100ml
　　自然pH
　　2．配制方法
　　(1)称新鲜黄豆芽10g,置于烧杯中,再加入100 m1水,小火煮沸30 min,用纱布过滤,补足失水,即制成10％豆芽汁.
　　（2)配制时,按每100 m1 10％豆芽汁加入5g葡萄糖,煮沸后加入2 g琼脂,继续加热融化,补足失水.
　　(3)分装、加塞、包扎.
　　(4)高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min.
　　(四)察氏(czapck)培养基的配制
　　1．培养基成分
　　蔗糖 3g
　　NaN03 0.3g
　　K2HP04 0.1g
　　KCl 0.05g
　　MgSO4·7H2O 0.05 g
　　FeS04 0.001 g
　　琼脂 1.5-2g
　　蒸馏水 100ml
　　自然pH
　　2．配制方法
　　(1)称量及溶化 量取所需水量约2／3左右加入到烧杯中,分别称取蔗糖、NaNO3 、K2HP04 、KCl、MgSO4.依次逐一加入水中溶解.按每100 ml培养基加入1ml 0.1％的FeS04溶液.
　　（2）定容 候药品全部溶解后,将溶液倒入量筒中,加水至所需体积.
　　（3）加琼脂 加入所需量琼脂,加热融化,补足失水.
　　(4)分装、加塞、包扎.
　　(5)高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min.
　　YPD培养基
　　YPD 或YPED,：Yeast Extract Peptone Dextrose Medium(1L),又叫酵母浸出粉胨葡萄糖培养基,加入琼脂的又叫酵母膏胨葡萄糖（YPD）琼脂培养基
　　用于酵母菌的培养
　　配方：1% Yeast Extract（酵母膏） ,2% Peptone（蛋白胨） ,2% Dextrose (glucose)（葡萄糖）,若制固体培养基,加入2%琼脂粉
　　配制方法：
　　1 溶解10gYeast Extract（酵母膏）,20gPeptone（蛋白胨）于900ml水中,如制平板加入20g琼脂粉
　　2 高压 121度 20min
　　3 加入100ml 10×Dextrose (glucose)（葡萄糖）,(葡糖糖溶液灭菌后加入)
　　注：葡萄糖,yeast extract ,peptone溶液混合后在高温下可能会发生化学反应,导致培养基成分变化,所以要分别灭菌后再混合.
　　YPEG：除了用3%乙醇和3%甘油代替葡萄糖作为碳源外,其他成分同YPD

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