（14分）以下是关于生物工程技术的应用实例。据题回答：Ⅰ1997年，科学家将动物体内的能够合成胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子重组，并且在大肠杆菌中表达成功。为使基因表达载体能

（14分）以下是关于生物工程技术的应用实例。据题回答：
Ⅰ．1997年，科学家将动物体内的能够合成胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子重组，并且在大肠杆菌中表达成功。为使基因表达载体能顺利进入大肠杆菌，一般需将大肠杆菌用 处理，以增大其细胞壁的 。基因表达载体随大肠杆菌的繁殖而进行增殖，其中的胰岛素基因在大肠杆菌内表达的标志是 （2分）。
Ⅱ．利用基因工程，可以使哺乳动物的乳腺成为一种“生物反应器”，生产大量药用蛋白。这种动物基因工程操作的一般过程是：
（1）首先，将 与 等调控组件重组在一起；
（2）然后，通过 的方法，导入哺乳动物的受精卵中；
（3）再次，将受精卵送入母体内，使其生长发育为转基因动物。从中选择 性个体，待其进入泌乳期后，可以在其分泌的 中来提取所需要的药用蛋白。
Ⅲ．继哺乳动物乳腺发生器研发成功后，膀胱生物发生器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培养出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。
（1）通常要将外源基因转入 中，原因是 （2分）；
（2）通常采用 技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组；
（3）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的 细胞中特异表达。Ⅰ．氯化钙（钙离子）　通透性　　大肠杆菌能产生动物的胰岛素（2分）

(答案→)Ⅰ．氯化钙（钙离子）　通透性　　大肠杆菌能产生动物的胰岛素（2分） 解析：Ⅰ．利用CaCl2处理细菌，可增大细菌细胞壁的通透性，胰岛素基因在大肠杆菌内表达的标志是大肠杆菌能产生动物的胰岛素。Ⅱ．基因工程的操作步骤是获得目的基因、构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞，目的基因的检测和鉴定。Ⅲ．由于受精卵（或早期胚胎）具有全能性，可使外源基因在相应组织细胞表达，所以选择受精卵（或早期胚胎）作为受体细胞。检测外源基因是否插入了小鼠的基因组的方法是DNA分子杂交法。研制膀胱生物反应器，应将外源基因导入小鼠的膀胱上皮细胞中。

我学会了