低温蛋白酶是海洋嗜冷细菌分泌的酶类，最适温度在20℃左右，作为洗衣粉添加剂可在较低的温度下达到理想的洗涤效果。下图为分离可分泌低温蛋白酶的某种嗜冷菌的操作步骤，据图回答问题：(1)

低温蛋白酶是海洋嗜冷细菌分泌的酶类，最适温度在20℃左右，作为洗衣粉添加剂可在较低的温度下达到理想的洗涤效果。下图为分离可分泌低温蛋白酶的某种嗜冷菌的操作步骤，据图回答问题：

(1)分装前，对培养基要进行 操作。为避免杂菌污染，要及时进行　 操作。
(2)将扩大培养后的深海微生物用　 法接种到含酪蛋白的固体培养基表面，在适宜条件下培养一段时间，挑出形成透明圈的单一菌落，即为初选出的嗜冷菌。从嗜冷菌分泌的蛋白质中分离出低温蛋白酶的最常用的方法是　 。
(3)为进一步检测分离出的低温蛋白酶的最适温度，将该菌按上图所示分5组分别置于　 中进行培养，　 组所对应的温度为最适温度。
(4)为提高酶的利用率，可以采用　 技术，常用的方法有　 。

(答案→) 解析：(1)培养微生物的培养基需要适宜的pH，因此制备培养基时应在分装前调pH，然后进行高压蒸汽灭菌。(2)微生物的接种方法主要有稀释涂布平板法和平板划线法，分离低温蛋白酶可以采用电泳法(凝胶色谱法)。(3)微生物的培养需要适宜的温度，因此应在恒温箱中进行培养。含有酪蛋白的培养基不透明，酪蛋白被低温蛋白酶分解后可形成透明圈，透明圈与菌落直径的比值反映了嗜冷菌分泌低温蛋白酶的能力。因此应挑选透明圈与菌落直径比值最大的菌体。(4)采用固定化酶技术可以实现酶的回收利用，因此可以提高酶的利用率。固定化酶常用化学结合法和物理吸附法。

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