琼脂糖凝胶电泳中回收DNA

琼脂糖凝胶电泳中回收DNA

根据你扩增的产物情况选择合适分辨率的凝胶浓度，比如：如果你的条带离引物二聚体很远，且比较单一，那可用1%~1.5%的胶即可，可稍微制厚一点，方便点样；如果你的条带只有一两百即离引物二聚体很紧或者非目标条带很多，那你需要浓度稍大一点的胶（3%~5%），电泳时间长一点，这样可使你的目的条带与非目的条带分开，方便切胶。胶制好后即可点样，一般会使用宽一点的梳子可使上样量加大，提高回收浓度。点完样后即可开始电泳，电泳结束后，在紫外光仪下条带可显示出来，用薄的锋利的刀片快速将目标条带切下，切胶时要注意：尽量把目标条带切下，尽量包含较少的琼脂糖胶，并切忌将非目的条带切下，还要注意尽量让紫外线照射时间短（因为紫外照射会发生核苷酸变异，产生TT二聚体）。目标条带切下后，可使用专门的琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒（很多公司都有），按照试剂盒的说明书即可回收其中的DNA。希望能帮到你，祝顺利！