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老师,请教一个qRT-PCR对照组数据统计的问题

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解决时间 2021-03-26 17:09
老师,请教一个qRT-PCR对照组数据统计的问题
最佳答案
不是减去,是除以追问可是我只是算-ΔΔCT啊,我指的对照组三次重负的均值是指三次的ΔCT啊,所以不是应该减吗追答我不太清楚你说的。不同基因间的ΔCT值不能直接相减。你不能把内参和目的基因的CT值相减。所以每一个试验点都应该算出一个相对量以后,再和其他的点比较。

比如你做了很多次试验了,现在要作图。你可以把所有试验的对照组都放在一起,得到一个基准点,作为1. 这样内参和目的基因都有一个基准点了。然后你再把各个点的数值和这个基准点比较。

如果只比较内参,或者目的基因,可以CT相减。但是不能直接相减不同基因的CT,只能先算出相对于基准点的相对量,再比较。因为不同基因的PCR扩增效率是不一样的。追问
谢谢!老师您看这样对吗?其中ΔCT(教程上说是目的基因减内参)是用各组基因的ct减内参ct,然后ΔΔCT(教程上说应该是实验组ct-对照组ct)那栏是用各组(包括对照与实验组)的ΔCT减对照组(con)三次的均值4.179,您看对吗?谢谢谢谢

追答教程上是错的,不同基因的Ct不能直接相减。这个事原则问题。所以“目的基因减内参”这第一步就错了。来自:求助得到的回答
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