免疫荧光用什么封闭比较好
免疫荧光中如果要封闭抗原 是用BSA吗 多少浓度 在孵育一抗前 还是之后
免疫荧光用什么封闭比较好
答案:1 悬赏:20 手机版
解决时间 2021-08-21 02:25
- 提问者网友：记得曾经
- 2021-08-20 20:17
最佳答案
- 五星知识达人网友：千夜
- 2021-08-20 20:23
BSA可以用来封闭,网上查到的浓度0．5％到2％都有,1％比较常见.
孵育一抗之前要加,封闭孵育时间过后,加一抗之前不要洗掉,只移除多余液体即可．之后不需要再封闭,但是一抗和二抗都应该用含有BSA的缓冲液来稀释.有些人还加tween来减少非特异性结合.
封闭抗原也可以使用二抗抗体所属动物种类的血清．没有统一固定的浓度要看情况.
用试剂盒则有自带的封闭试剂,效果更稳定有保障.
免疫染色实验一个重要特点就是最佳条件都是试出来的,每换一个抗体条件都可能需要调整.所以最好的办法是用生产商测试过的实验方法.写个邮件问一下,就这么简单.
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