qpcr染料法的染料试剂有几种

qpcr染料法的染料试剂有几种

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博凌科为的2 x sybr green qpcr mix (荧光染料法）是采用sybr green i嵌合荧光法进行real time pcr的专用试剂。已经将热启动hotmaster taq dna聚合酶、dntp、特殊稳定剂、优化的反应缓冲液、bsa和sybr green i等试剂预混成一种适合real time pcr反应检测用2×premix type试剂，具有灵敏度高、特异性强、稳定性好等特点。使用时只需加入模板和引物和水，便可在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线，对目的基因进行准确定量检测，重复性好，可信度高。本品采用全新的hotmaster taq dna 聚合酶，该酶不同于一般hot-start 酶之处在于，一般的hot-start 酶只在第一步温度升高之前封闭酶的活性，而hotmaster taq dna 聚合酶是利用抑制剂通过温度调节方式封闭hotmaster taq dna聚合酶的底物结合位点，温度低于40℃时，形成非活性的酶-抑制剂复合物，当温度升高至引物特异性的退火温度时，结合平衡向模板-特异性引物复合物形成方向移动，因此最大限度的减少pcr扩增全程中的非特异性扩增产物产生，大大提高了荧光定量pcr反应的精确性。 注意事项： 1. 本制品不含内参染料rox，客户并根据qpcr仪器技术指导决定是否需要加rox内参染料，用于消除信号本底以及校正孔与孔之间产生的荧光信号误差，配套rox产品货号为pc38 rox reference dye。 2. 本制品含sybr® green i 强光下易分解，降低敏感度，使用时避免长时间强光照射本制品。 3. 建议在冰上配制pcr反应液，再放入pcr仪器中扩增。可以提高扩增特异性，减少背景。 4. 本制品含有4 mm mgcl2（反应体系终浓度是2 mm mg2+），可用25mm mgcl2 优化mg2+浓度。