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在基因表达载体的构建步骤中,原质粒是否含有启动子和终止子?

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解决时间 2021-04-15 23:03
在基因表达载体的构建步骤中,原质粒是否含有启动子和终止子?
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单单从“原质粒是否含有启动子和终止子”这个问题本身来讲,答案是肯定的。可以用来做基因工程载体的质粒,一个最重要的前提就是,它能自主复制。自主复制,作为一个质粒它要实现这个功能那么就必须进行相关调控蛋白的表达。启动子作为RNA-pol的DNA结合位点(对DNA质粒来讲)或RNA结合位点(对RNA质粒来讲),在启动转录时是必须的。 这是一般意义上的启动子。不过以我的理解,楼主所说的启动子,应该是像T7,tac,Lac这样的基因工程中比较关键的诱导型启动子。对于这些启动子,在原载体质粒上,有还是没有,这个都无紧要或者说可有可无。比如pQE系列载体,商业化的产品一般都自带T5启动子,哪一天我要用某个pQE载体去转没有T5 RNA-Pol而含T7RNA-Pol的宿主,那我可以在我的目的基因上游添加一个T7启动子来实现目的蛋白的表达,如果我还想用IAA而不是IPTG来作为诱导剂来启动表达,那我就把Lac换成Trp启动子。。。。有启动子我可以改、可以换,没有我可以添加,这就是载体构建的过程。事实上,目前载体构建的思路随着相关技术的发展,可以说想怎么玩就怎么玩。
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没有
这个必须有
上面这位基本正确,但是原质粒上的抗性基因不是标记基因,因为你不知道他抗什么,所以制造筛选培养基就会很麻烦,所以这里的标记基因指人工加上的片段
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