两种刚果红染色法的问题

。两种刚果红染色法的比较 刚果红在筛选纤维素分解菌上的应用已经有超过20年的历史，在本课题中我们给出了两种方法。方法一是传统的方法，缺点是操作繁琐，加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂；其优点是这样显示出的颜色反应基本上纤维素分解菌的作用。方法二的优点是操作简便，不存在菌落混杂的问题，缺点是由于纤维素和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质，可以使能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应。但这种只产生淀粉酶的微生物产生的透明圈较为模糊，因为培养基中纤维素占主要地位，因此可以与纤维素酶产生的透明圈相区分。方法二的另一缺点是：有些微生物具有降解色素的能力，它们在长时间培养过程中会降解刚果红形成明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区分。 两种方法之前，菌株都有先经过选择培养基的培养吗？ 两种方法都有用鉴别培养基吗？如果有，那方法二会出现假阳性反应（鉴别培养基含土豆汁），方法一为什么就不会呢？
既然方法二会产生假阳性反应，为什么还要在鉴别培养基里加上土豆汁？不加土豆汁的话，假阳性反应的程度不是会轻些吗？ 请再具体说说什么事假阳性反应。（高中）

1、加入氯化钠溶液的作用是洗去未结合或者结合不牢的刚果红染液，使透明圈更清晰。没啥可具体的了。。。
2、鉴别培养基加土豆汁是为了细菌更好的生长。因为土豆汁是比纤维素更好的碳源（你可以理解为更好吃的食物），有土豆淀粉的情况下细菌可以更好的生长和繁殖，只有细菌繁殖到一定数量才能进行下面的鉴定操作，所以土豆汁是必须加的。
3、假阳性反应就是假的阳性反应。我们认为，刚果红染色后，我们需要的菌会表现出阳性反应（即透明圈）。但方法二有可能出现不是我们要的菌，但也出现了透明圈，所以被误认为我们要的菌，这就是假阳性反应。
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其实方法一是后染色，方法二是先染色。先染色就导致染液在培养基中的时间较长，虽然刚果红是只染纤维素，淀粉等的分解产物虽不影响纤维素，但会冲淡染色反应，出现模糊透明圈（即假阳性）。另外还有色素分解的问题。如果是后染（方法一），之前没有染液存在，就没有冲淡的问题了，就没有假阳性了。

刚果红染色法： 常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是在倒平板时就加入刚果红。 方法一 在长出茵落的培养基上，覆盖质量浓度为1 mg／mi。的cr溶液，10～15 min后，倒去cr溶液，加入物质的量浓度为l mol／i。的naci溶液，15 min后倒掉nacl溶液，此时，产生纤维素酶的茵落周围将会出现透明圈。 方法二 配制质量浓度为10 mg／mi。的cr溶液，灭菌后，按照每200 mi。培养基加入1 mi。的比例加入cr溶液，混匀后倒平板。等培养基上长出茵落后，产生纤维素酶的菌落周围将会出现明显的透明圈。 两种刚果红染色法的比较 刚果红在筛选纤维素分解菌上的应用已经有超过20年的历史，课本中给出了两种方法。方法一是传统的方法，缺点是操作繁琐，加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂；其优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用。方法二的优点是操作简便，不存在菌落混杂问题，缺点是由于在纤维素粉和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质，可以使能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应。但这种只产生淀粉酶的微生物产生的透明圈较为模糊，因为培养基中纤维素占主要地位，因此可以与纤维素酶产生的透明圈相区分。方法二的另一缺点是：有些微生物具有降解色素的能力，它们在长时间培养过程中会降解刚果红而形成明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区分。