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生物样品内标法和外标法会有区别吗

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解决时间 2021-02-26 04:49
生物样品内标法和外标法会有区别吗
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生物样品内标法和外标法会有区别
外标法就是用标准品的峰面积或峰高与其对应的浓度做一条标准曲线,测出样品的峰面积或峰高,在标准曲线上查出其对应的浓度,这是最常用的一种定量方法,内标法是对应外表法说的,外表法需要用样品和标准品对比,但是有时我们很难保证样品和标准品进的体积是一样的,毕竟要有误差,这时候就用内标法,就是在外标法的基础上,在样品和标准品里在加入一种物质,通过加入物质的峰面积或峰高的变化,就可以看出我们标准品和样品进样体积的差别,但同时会引进加入物质的秤量误差.所以一般用外标法来定量,如果进样体积很难掌握,就用内标法,可以消除进样体积的误差
归一化法的前提是:被测主分都要出峰,还要知道他们个组分之间的相对较这个内因子,然后根据个组分所占的面积比例求得个组分的含量。
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内标法:通过内标物与对照品的浓度、峰高/面积计算校正因子,然后通过校正因子、待测物峰高/面积、内标物浓度、峰高/面积,计算待测物浓度;需要与待测物性质非常相似(如吸收系数、出峰位置,但是不能干扰待测物)的内标物。 外标法:通过对照品浓度、峰高/面积和待测物的峰高/面积,计算待测物浓度。 内标法优劣:1.优势:内标法可以减小样品前处理所造成的误差,如前面那位同学所说的定容过程变得不那么重要——前提是内标物与对照品称量好了在同一个容器中定容;另外,如果是采用手动进样的话,进样量的误差对结果的影响也可避免。2.劣势:由于内标物选择的诸多要求,合适的内标难以寻找;操作繁琐。 外标法劣势及解决:进样量误差对结果影响较大,但现在色谱仪一般都有自动进样器,可解决这个问题。 另外,用内标法或外标法计算待测物浓度的方法,参考中国药典二部。
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