(8分)【生物——现代生物科技专题】2008年1月7日，东北农业大学培育出我国第二代绿色荧光蛋白转基因克隆猪。研究人员是先从一种特殊水母中提取绿色荧光蛋白基因，然后把该基因经过处理

(8分)【生物——现代生物科技专题】2008年1月7日，东北农业大学培育出我国第二代绿色荧光蛋白转基因克隆猪。研究人员是先从一种特殊水母中提取绿色荧光蛋白基因，然后把该基因经过处理后转移到培养的猪胎儿成纤维细胞的基因组中，再把转基因体细胞的细胞核移植到成熟的去核猪卵母细胞中构建成转基因胚胎。再经过手术移植入受体母猪，经过发育最终获得绿色荧光蛋白转基因克隆猪。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图。请据图回答：

⑴过程①和②必需用到的酶是 。
⑵重组质粒除了带有绿色荧光蛋白基因以外，还必须含有 才能构成一个完整的基因表达载体。
⑶为了获得更多的猪卵母细胞，可通过对母猪注射 的方法，做超数排卵处理，并将所采集到的卵母细胞在体外培养到 期即可通过显微操作将其细胞核去除。
⑷早期胚胎的培养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及 等物质。
⑸如果想同时得到多头绿色荧光蛋白转基因克隆猪，可通过胚胎分割技术得以实现。但应选择 的早期胚胎进行操作，且要注意 ，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
⑹与一般的繁育良种动物方式相比较，胎移植的优势是 。（共8分，每空1分）⑴限制酶和DNA连接酶（缺一不可） ⑵启动子、终止子和标记基因（缺一不可）⑶促性腺激素 减数第二次分裂中期 ⑷血清 ⑸发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚 将内细胞团均等分割 ⑹可充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力

(答案→)（共8分，每空1分）⑴限制酶和DNA连接酶（缺一不可） ⑵启动子、终止子和标记基因（缺一不可）⑶促性腺激素 减数第二次分裂中期 ⑷血清 ⑸发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚 将内细胞团均等分割 ⑹可充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力 解析：主要考查了基因工程和胚胎工程有关的知识点。基因工程的工具有限制酶、DNA连接酶、运载体等。基因工程的核心是基因表达载体的构建，一个完整的基因表达载体包括目的基因、标记基因、启动子和终止子等四部分。卵母细胞的获取，一般采用注射促性腺激素，使动物超数排卵，然后从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。对于大型的动物或大家畜，也可以采用活体采卵的方式。当卵母细胞培养到减数第二次分裂中期时才具有受精的能力。早期胚胎一般用发育培养液培养，其成分比一般的要复杂，还要加入血清等物质。在进行胚胎分割时，一般选择发育良好、形态正常的囊胚或桑椹胚，且要注意将内细胞团均等分裂，否则会影响到分割后胚胎的恢复和进一步发育。胚胎移植具有充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力。

好好学习下