半定量RT-PCR电泳图如何分析

答案:1 悬赏:30 手机版

解决时间 2021-10-22 20:20

提问者网友：浮克旳回音
2021-10-22 02:43

半定量RT-PCR电泳图如何分析

最佳答案

五星知识达人网友：轮獄道
2021-10-22 03:08

半定量RT-PCR参照的做法一般有两种:1) 将要比较的两个样品的BETA-ACTIN 调成一样的亮度，然后就可以直接比较目的基因的亮度了。方法的结果比较直观，但较费事。2) 不进行调平，一个样品里将目的基因和BETA-ACTIN直接比较，用软件就可以做到，然后将不同样品的这个比值进行比较就可以了。方法比较简单，但结果不够直观。1.每个标本都要做自己的内参，不能用同一个内参!2.每个标本在实际做前都要摸最佳循环数，包括内参，但内参的循环数不一定要和目的基因一样，都要选择上升期的中间数作为最佳循环数，否则进入平台期就没有可比性了!所以内参要有它自己的最佳循环数!3.电泳扫描后，计算灰度值，先用同一标本的内参和目的进行比较，然后用这个相对值再去和其他你所要比较的平行组进行比较，一般每组4个样本以上。这样就可以知道各组之间的差别了!

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