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为什么加入磁珠的量不同,筛选片段不同

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解决时间 2021-02-22 14:05
为什么加入磁珠的量不同,筛选片段不同
最佳答案
buffer中成分量不同,磁珠吸附的片段大小不同。具体参考链接网页链接
全部回答
一氪生物磁珠法核酸纯化试剂 1纯化反应干扰物 干扰物有高浓度蛋白、BSA,这两种物质会导致磁珠聚沉,从而影响纯化效率,需要添加SDS处理后进行纯化。 2片段选择性能准确性干扰物 干扰物有yichun,异Bing醇,聚乙er醇,会影响片段选择回收效果,需要上调或下调磁珠使用量。 3回收片段大小限制: 大小范围为100bp-20kb,超范围片段回收效率将显著降低。 4应用范围限制: 仅用于常规分子生物学反应溶液中的DNA的纯化,磁珠不含裂解细胞及蛋白成分,不可用于组织、细胞、血浆等生物样本的DNA提取。 5原有过膜纯化方法更换为磁珠纯化方法可能带来的预期外影响 磁珠法纯化不同于过膜法纯化的原理,在替换的过程中可能预见的问题主要有: 1)磁珠法纯化中,纯化产物会存在痕量的反应液残留。 2)纯化片段大小可能发生变化 评价检测方法: 1)杂质残留影响,建议进行试用评估及测试,检测最终结果。 一般的二代测序文库构建过程中,末端修复、3‘端加A、及接头连接反应中应用磁珠法纯化,痕量残留不会对后续反应造成影响。 2)有特殊片段大小需求的情况下,可根据目标片段大小选择适宜的纯化磁珠用量。
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