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解答题现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质,实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来

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解决时间 2021-01-04 16:21
解答题 现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质,实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性,并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究,完成下列实验报告并回答有关问题。【实验原理】有毒物质能诱导细胞产生变异,根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值),可判断该化学物质的毒性。【实验材料】活的小白鼠胚胎。【药品用具】胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、培养瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂各时期高倍显微照片。【实验步骤】(1)制备细胞悬浮液:把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎,转入锥形瓶中,加入____处理,使胚胎组织分散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬浮液。(2)进行细胞培养:①取A、B、C三个洁净的培养瓶,____,加入等量的细胞悬浮液。②向A培养瓶中加入化学物质甲,向B培养瓶中加入____,向C瓶内加入等量的生理盐水,并将培养瓶摇匀。③在实验中,C培养瓶起什么作用?____。(3)制作临时装片①当细胞增殖到大约第8代左右时,同时从恒温箱中取出三个培养瓶,用胰蛋白酶液处理,使培养的细胞____,再加入动物细胞固定液以便迅速杀死细胞并固定细胞。②静置一段时间后,分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液,滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央,用____染色,3~5min后,盖上盖玻片。(4)镜检和统计把临时装片放在显微镜下,先用低倍镜后用高倍镜,寻找处于____期的细胞,并与C组对比以确认发生变异的细胞,同时统计____。【结果与结论】经研究人员实验得知:A、B、C三个培养瓶的Q值依次为:QA=1.3%、QB=12.5%、QC=0.1%,由此可知该实验的结论是____。
最佳答案
(1)胰蛋白酶液;(2)消毒灭菌;等量的化学物质乙;对照;(3)从瓶壁上脱落;适宜浓度的龙胆紫溶液;(4)细胞有丝分裂中期;该期变异的细胞占该期细胞总数的百分数(Q值);实验的结论是:甲乙都是有毒性的,且乙的毒性大于甲解析(1)胰蛋白酶能够使动物组织分散成单个细胞。(2)培养瓶在加入培养液前需消毒灭菌,该实验的自变量是有毒物质的有无以及浓度,因变量是染色体的变异情况,所以需向三个培养瓶中加入等量的细胞悬浮液,并放在相同适宜温度的培养箱中培养。检测染色体的方法是龙胆紫染液。(4)QA>QC、QB>QC,说明甲、乙两种化学物质均有毒性,QB>QA,说明乙的毒性大于甲。C瓶起对照作用,C瓶中Q值>0,说明动物细胞在正常培养状态下变异频率很低。
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