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转染时细胞融合度汇合度为什么要那么高

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解决时间 2021-03-12 00:47
转染时细胞融合度汇合度为什么要那么高
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汇合度(我称之为铺满度)本身就不是一个很精确的指标。它用来衡量细胞在培养皿中的总的生长情况。其意义在于sub-confluence,就是不要铺满以免密度抑制,为我们试验的时间选择和培养的传代时间提供一个粗略的参考。我看国外的文献都是说about70%(一个范围,因为在一定的范围内细胞的状态是可以被认为相同的)的confluence。引用自丁香园战友erythrocyte2005 ;
在Gibco细胞培养基本知识手册中有提到汇合状态一词,其原句如下:原代培养是指将 细胞从组织中分离后,使其在合适的条件下增殖直到占据所有可用基质(即:达到汇合状态)的培养阶段。
一般的转染试剂比如Lipofectamine™2000是具有细胞毒性的,汇合度高一点也就是细胞密度大一点会对转染试剂具有耐受性,但是细胞密度过大又会影响后续的实验,所以要根据所养细胞类型及状态与后续实验目的安排,合理选择细胞汇合度,汇合度的判断一般可以凭借经验粗略判断。
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细胞融合(cell fusion),细胞遗传学名词,是在自发或人工诱导下,两个不同基因型的细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。基本过程包括细胞融合形成异核体(heterokaryon)、异核体通过细胞有丝分裂进行核融合、最终形成单核的杂种细胞。细胞融合可作为一种实验方法被广泛适用于单克隆抗体的制备,膜蛋白的研究。
当细胞平均铺在培养瓶上后,呈单个独立的状态,随着细胞生长,就会向周围平铺,形成一个一个克隆,随着克隆的增大,临近的两个克隆就汇合了。 汇合度指两两连接在一起的克隆数目占总的比率。
当细胞平均铺在培养瓶上后,呈单个独立的状态,随着细胞生长,就会向周围平铺,形成一个一个克隆,随着克隆的增大,临近的两个克隆就汇合了。 汇合度指两两连接在一起的克隆数目占总的比率。 再看看别人怎么说的。
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