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为什么要用总RNA获得cDNA

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解决时间 2021-01-29 07:49
为什么要用总RNA获得cDNA
最佳答案
确实需要RNA酶,但是RNA酶的作用是水解RNA不是合成mRNA~~cDNA文库的建立流程:提取mRNA——cDNA第一条链的合成——cDNA第二条链的合成——cDNA末端处理cDNA第一条链的合成:在这一步里,只需要逆转录酶(依赖RNA的DNA聚合酶),以mRNA为模板合成DNA。这一步里最忌有RNA酶了(要不然就没有模板了!)~~这一步最后生成mRNA-cDNA复合体cDNA第二条链的合成:这个时候就是你问题里由mRNA-cDNA复合体合成cDNA了。这个时候是用DNA聚合酶以DNA为模板~最后就得到双链DNA了,就是我们要的cDNA!!!所以你的问题就解决了吧:要用RNA酶把mRNA水解掉,然后DNA聚合酶才能结合到模板上,聚合生成DNA~~
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