蛋白marker需要加loading buffer吗
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解决时间 2021-03-01 19:35
- 提问者网友：謫仙
- 2021-03-01 03:29
蛋白marker需要加loading buffer吗
最佳答案
- 五星知识达人网友：煞尾
- 2021-03-01 04:57
现在用预染MAKER，不用加loading buffer的，也不用变性！
未预染marker需要加loading buffer。
loading buffer的功能主要有两个。第一，里边的指示剂溴酚蓝和二甲苯氰FF起到指示的作用，显示电泳的进程，以便我们适时终止电泳；第二，里边的成分甘油可以加大样品密度，使样品密度大于TAE，从而沉降到点样孔中，防止样品飘出点样孔。另外，有的Buffer是加有SDS的，一般都会写明。SDS主要是促使聚合酶变性，因为没有除尽的聚合酶会结合在DNA双链上影响它的迁移速率。细胞裂解后的裂解液，加loading 100℃加热，也是为了中止酶促反应，防止提取的蛋白质降解。
未预染marker需要加loading buffer。
loading buffer的功能主要有两个。第一，里边的指示剂溴酚蓝和二甲苯氰FF起到指示的作用，显示电泳的进程，以便我们适时终止电泳；第二，里边的成分甘油可以加大样品密度，使样品密度大于TAE，从而沉降到点样孔中，防止样品飘出点样孔。另外，有的Buffer是加有SDS的，一般都会写明。SDS主要是促使聚合酶变性，因为没有除尽的聚合酶会结合在DNA双链上影响它的迁移速率。细胞裂解后的裂解液，加loading 100℃加热，也是为了中止酶促反应，防止提取的蛋白质降解。
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- 1楼网友：走死在岁月里
- 2021-03-01 06:34
marker中是不需要加 上样缓冲液的。
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