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T载体克隆的试剂配制

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解决时间 2021-02-16 22:52
T载体克隆的试剂配制
最佳答案
20mg/ml X-gal X-gal为5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D半乳糖苷。用二基甲酰胺(DMF)溶解X-gal配制成的20mg/ml(取0.02gX-gal,用DMF定容为1ml)的贮存液。保存于一玻璃管或聚丙烯管中,装有X-gal溶液的试管须用铝箔封裹以防因受光照而被破坏,并应贮存于-20℃。X-gal溶液无须过滤除菌。(DMF二甲基甲酰胺; Dimethylformamide; N,N-Dimethylformamide; DMF; CAS:68-12-2 理化性质:无色、淡的胺味的液体。分子式C3-H7-N-O。分子量73.10。相对密度0.9445(25℃)。熔点-61℃。沸点152.8℃。) 溶于DMSO,溶解度可达20mg/ml。也溶于DMF
200mg/ml IPTG 在0.8ml蒸馏水中溶解0.2g IPTG后,用蒸馏水定容至1ml,用0.22μm滤器过滤除菌,贮存于-20℃。
LB培养基:
配制每升培养基,应该在950 ml去离子水中加入:胰化蛋白胨 10g 酵母提取物 5g NaCl 10g 摇动容器直至溶质溶解.用5mol/LNaOH调pH至7.3.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌20min.( 100mlLB培养基加入1.5g琼脂粉为固体培养基)
0.1mol/LCaCl2:取0.11098g氯化钙固体定容至10ml
Amp(100mg/ml):溶解0.1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中,最后定容至1ml,用0.22μm滤膜过滤除菌.

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