原核基因采取什么方法获得

原核基因采取什么方法获得

原核生物的基因则可直接用限制酶从DNA切取。因为原核生物的基因是连续不间隔的,直接切取就可得到目的基因，再PCR扩增后就能得到大量目的基因。
原核生物基因分为编码区与非编码区。非编码区上的基因决定某些性状是否表达，表达多少次以及何时开始表达。所谓的编码区就是能转录为相应的信使RNA，进而指导蛋白质的合成，也就是说能够编码蛋白质。非编码区则相反，但是非编码区对遗传信息的表达是必不可少的，因为在非编码区上有调控遗传信息表达的核苷酸序列。非编码区位于编码区的上游及下游。在调控遗传信息表达的核苷酸序列中最重要的是位于编码区上游的RNA聚合酶结合位点。RNA聚合酶是催化DNA转录为RNA。，能识别调控序列中的结合位点，并与其结合。
限制酶 restriction enzyme 是参与寄主支配性限制的酶，可识别 DNA的特定碱基排列而切断链的核酸内切酶，因此，又称为核酸内切限制酶，目前已从各种细菌类中得到纯化的特异性不同的酶。这种酶广泛存在于生物界，并因生物种属的不同而其特异性有所不同。因此在酶的名称上加有生物种属的简称。例如，从流感嗜血杆菌d（H－aemophilus influenzae d）菌株中分离出的酶称为Hind限制酶或R．Hind（R为限制的缩写）。又在同一生物种属中含有复数的酶时，则再加上I，I等数字，从大肠杆菌的B株、K株等分离出来的酶，在反应时，必须有ATP、 S-腺苷蛋氨酸和Mg2 。与此相对应的，从持有耐药因子的大肠杆菌中分离出的酶（R．Eco RⅠ，Ⅱ）和从嗜血杆菌属（Haemoph-lius）分离出的酶（R．Hap， R．Hind， R．Hpa等），只需要Mg2 。这些酶决定着切断部位的碱基排列。虽排列因酶而有所不同，但都是具有双重旋转对称性。例如，R·HindⅡ如下图所示，是在第6个碱基排列的部位按箭头的位置切断（A：腺苷，C：胞苷，G：鸟苷，T：胸苷，P：磷酸）：另一方面，该菌含有的修饰酶在上面排列的腺苷上（带*号的）使其甲基化，一旦甲基化后限制酶就不起作用了。通常认为限制酶和修饰酶在结构上是有关连的，例如，大肠杆菌B株的限制酶是由三个亚基组成，而修饰酶是由其中的二个亚基组成。

用限制性核酸内切酶切割