PCR Buffer里面的镁离子浓度多少,买的时候是分装的,怎么配,还是不用先混???
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解决时间 2021-01-15 11:39
- 提问者网友:棒棒糖
- 2021-01-15 04:01
PCR Buffer里面的镁离子浓度多少,买的时候是分装的,怎么配,还是不用先混???
最佳答案
- 五星知识达人网友:独钓一江月
- 2021-01-15 04:24
说明书上应该写得很清楚。
一般买来分装的PCR酶和BUFFER,如果用的次数不多,可以当时用,当时混合;
如果经常使用,可以在使用前,先将BUFFER混合起来,即将镁离子、dNTP等混合起来,酶除外。酶当场加会比较好,可以将酶分装,减少冻融次数。
最后,还是提醒一下,以说明书使用方法为准~追问买来的时候里面有酶 、BUFFER 和Mg离子 三管,说明书上没说怎么配,Buffeer和Mg离子都是满管追答酶的话,肯定会写每次用多少U,你自己算算
BUFFER上的应该也会写是多少×的,N×就稀释N倍
镁离子肯定有初始浓度,参照说明书上的终浓度,自己计算稀释,如果说明书上没写,一般终浓度以20mM效果最好
一般买来分装的PCR酶和BUFFER,如果用的次数不多,可以当时用,当时混合;
如果经常使用,可以在使用前,先将BUFFER混合起来,即将镁离子、dNTP等混合起来,酶除外。酶当场加会比较好,可以将酶分装,减少冻融次数。
最后,还是提醒一下,以说明书使用方法为准~追问买来的时候里面有酶 、BUFFER 和Mg离子 三管,说明书上没说怎么配,Buffeer和Mg离子都是满管追答酶的话,肯定会写每次用多少U,你自己算算
BUFFER上的应该也会写是多少×的,N×就稀释N倍
镁离子肯定有初始浓度,参照说明书上的终浓度,自己计算稀释,如果说明书上没写,一般终浓度以20mM效果最好
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- 1楼网友:往事隔山水
- 2021-01-15 06:02
四谁氯化镁配成25Mm的,用的时候根据你优化的浓度用,这个浓度跟你选择的酶和引物浓度多少都有点关系。
- 2楼网友:洎扰庸人
- 2021-01-15 04:59
通常情况没有加镁离子的buffer 都会写清楚with out Mg+,这样的就需要加镁离子。镁离子的量通常加总体积的5%到10%。一般在管壁上都会有标明。
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