细胞培养液总是很快就变碱了，是为什么呢？以前都不是这样的

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解决时间 2021-01-23 15:21

提问者网友：末路
2021-01-22 20:14

最佳答案

五星知识达人网友：笑迎怀羞
2021-01-22 20:27

很有可能这次分装或调Ph的时候染菌了，但菌由于某些原因增殖得并不迅速，但是会分解培液成份，导致酸碱度改变。可以将培养取出一些放入培养箱中检测，如果很快细菌增殖，说明就是这个原因。

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1楼网友：duile
2021-01-22 22:20

在培养时需要加入5%的二氧化碳在恒温箱中以调节ph值，你可能忘记加二氧化碳了吧....

2楼网友：末日狂欢
2021-01-22 21:13

我用的f12k和dmem的1：1培养基，分50ml分装好（由于用量不大），单是每次用的还剩10ml左右的时候，培养基的颜色就会在一天内变成紫红色，应该是ph值升高了吧，就是不知道原因啊，也不敢用。而且平常如果大于10ml存放，好像几天都没有关系。想请问各位高手，是什么原因呢？怎么才能把ph值调回来呢？放在co2培养箱里让它变回来吗？那么这段变回来的时间对细胞的生长不是也会有影响吗？你的观察力很好，也乐于思考，这是实验室一个非常常见的现象，但很少有人问为什么。这种现象一般都是见于：大的容器里只装有少量的培养基时，或小量分装时瓶盖密封不好时，尤以放在冰箱保存时明显。原因其实很简单：一个就是co2逸出培养基，导致ph值升高，酚红就会指示颜色变紫红了。另一个就是温度的原因，温度是影响ph值一个很重要的因素。放在冰箱里，ph自然要比室温以及37℃时要高。还记得分子克隆上配pbs的那一页不？都是在特定温度下特定ph值的配方！这两个原因叠加的结果就是你看到的现象。变碱的培养液不必额外再加什么来调节ph值，当放回co2培养箱时，由于高浓度co2的平衡作用，ph值会很快自动恢复的，对细胞生长影响不大。如果你在培养细胞时发现培养液在co2培养箱里颜色变紫红了，那赶紧补充培养箱的co2气吧，没气了！

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