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凝胶过滤分离蛋白质实验图中若只出现一个峰的原因是什么?还有出现前面的峰小于后面的峰又是为什么?

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解决时间 2021-11-11 12:52
凝胶过滤分离蛋白质实验图中若只出现一个峰的原因是什么?还有出现前面的峰小于后面的峰又是为什么?
最佳答案
您好!凝胶过滤分离蛋白质实验图中若只出现一个峰的原因:
① 蛋白纯度很好:)这个可能性不大。
② 选用的分子筛颗粒尺寸不对,或者太大或者太小,太大的话,所有蛋白都在内水体积出,太小的话,所有蛋白都在外水出了。
③ 分子筛凝胶因为压力太大等原因,颗粒破碎了。。。
出现前面的峰小于后面的峰:
① 如果出现两个以上峰,至少说明它有一定的分离效果啦。
② 说明选用的这个凝胶对于待纯化蛋白溶液来说,进入外水体积的蛋白就是颗粒较大蛋白含量少,进入内水体积的蛋白就是颗粒较小蛋白含量少。具体的根据电泳结果来判断,看你的目的蛋白在哪一段,是否还能优化分子筛孔径。

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感谢您的采纳,O(∩_∩)O 如有疑问,欢迎追问。追问最后的第二点不大明白。“具体的根据电泳结果来判断,看你的目的蛋白在哪一段,是否还能优化分子筛孔径。”好像实验没用电泳吧?追答那可能是你们实验不用跑电泳。
但一般蛋白纯化的话,层析后会跑个电泳来确定目的蛋白所在的洗脱峰。
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