pcr 产物测序后双峰,我该怎么办
答案:1 悬赏:10 手机版
解决时间 2021-11-08 03:42
- 提问者网友:捧腹剧
- 2021-11-07 04:44
pcr 产物测序后双峰,我该怎么办
最佳答案
- 五星知识达人网友:思契十里
- 2021-11-07 06:17
可能有三种原因:
一,pcr产物不纯,电泳条带单一并不一定就说明没有非特异性扩增,也可能非特异性扩增产物与目标产物size相近,或浓度很低。
解决办法是提高退火温度做pcr,或直接换pcr引物,再或者可以补订专门的测序引物做测序反应,提高测序反应特异性。
二,pcr产物纯化做的有问题。
可补做纯化看看。
三,测序引物有污染。
可补送引物测序。如果做的是克隆测序,还有可能是纯在双克隆。
一,pcr产物不纯,电泳条带单一并不一定就说明没有非特异性扩增,也可能非特异性扩增产物与目标产物size相近,或浓度很低。
解决办法是提高退火温度做pcr,或直接换pcr引物,再或者可以补订专门的测序引物做测序反应,提高测序反应特异性。
二,pcr产物纯化做的有问题。
可补做纯化看看。
三,测序引物有污染。
可补送引物测序。如果做的是克隆测序,还有可能是纯在双克隆。
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