乳杆菌16srDNA序列分析 先提取DNA然后PCR,扩增后纯化一下直接送去测序还是需要载体连接后才能送去测序？
答案:4 悬赏:40 手机版
解决时间 2021-02-17 15:22
- 提问者网友：喧嚣尘世
- 2021-02-16 16:52
乳杆菌16srDNA序列分析 先提取DNA然后PCR,扩增后纯化一下直接送去测序还是需要载体连接后才能送去测序？
最佳答案
- 五星知识达人网友：轻雾山林
- 2021-02-16 17:54
PCR纯化之后直接送测序也是可以的，但是测序结果前面有几十个碱基是不准确的
所以严格来讲还是应该克隆后再测序，选用克隆载体上的引物可以完整准确的测出16SR序列追问谢谢哦
所以严格来讲还是应该克隆后再测序，选用克隆载体上的引物可以完整准确的测出16SR序列追问谢谢哦
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- 1楼网友：西风乍起
- 2021-02-16 21:46
不纯化也可以送测，测序结果回来取有效的一部分进行比对，如果相似性较低（97.5%左右），然后再做TA克隆，以获得16S的全长。（如果你要做新种鉴定的话）
直接测序的话，一开始的几十个bp不准确，而且几百个bp之后的序列可靠程度也不是很高。做完TA克隆再测序，基本上可以得到16S的全长。
直接测序的话，一开始的几十个bp不准确，而且几百个bp之后的序列可靠程度也不是很高。做完TA克隆再测序，基本上可以得到16S的全长。
- 2楼网友：你哪知我潦倒为你
- 2021-02-16 20:34
都可以的
- 3楼网友：英雄的欲望
- 2021-02-16 19:33
哇塞，期待高人，表示连题目都没看懂！
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