有人了解金银花木犀草苷的含量怎样测定吗

有人了解金银花木犀草苷的含量怎样测定吗

步骤如下：1、仪器与试药日本岛津LC一2010高效液相色谱仪，Phenome―flexLunaC8(250mm×4．6mm，5Ixm)，紫外光谱测定用岛津2550型单光束紫外分光光度仪。木犀草苷对照品(中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号：117720―200501)。金银花药材为市场抽验样品(批号：070901，0700902，070801，20070818，070701，20070401，070711)。水为去离子水，乙腈、四氢呋喃为色谱纯，磷酸为分析纯。2溶液制备2．1对照品溶液精密称取木犀草苷对照品21．37mg，置50mL棕色量瓶中，加70％乙醇制成427．4Ixg・mL对照品储备液。取木犀草苷对照品储备液2mL于25mL量瓶中，加70％乙醇稀释至刻度，再取稀释溶液3mL于10mL量瓶中，加70％乙醇稀释至刻度，制成10．26lxg・mL的对照品溶液。2．2供试品溶液取本品粉末(过4号筛)1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加人70％乙醇50mL，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率33kHz)1h，放冷至室温，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。3色谱条件色谱柱：用辛基硅烷键合硅胶柱PhenomenexLuna―C8(250mill×4．6mm，5lxm)；流动卡目：0．4％磷酸溶液一四氢呋喃一甲醇(79：11：10)；流速：1mL・min～；检测波长为350nm；柱温：30cC；进样量：10lxL。在本色谱条件下，理论板数以木犀草昔峰计不低于7000。4专属性考察精密吸取对照品溶液及供试品溶液各10L，注人液相色谱仪，记录色谱图，见图1。结果样品色谱图中木犀草苷峰与前后峰的分离度分别为2．89和1．99，符合高效液相色谱定量分析的要求。理论塔板数以木犀草苷计为9000以上。5线性关系考察取浓度为427．4lxg・mL一的对照品储备液适量，加70％乙醇配制得170．96，85．48，34．192，17．096，10．2576，8．568，3．4272，1．7138，0．8568lxg・mL一的系列对照品溶液，摇匀，分别进样10L。以进样量()为横坐标，峰面积积分值y为纵坐标，绘制标准曲线，求得回归方程为：Y：2．465×10X+2．332×10r=0．9999表明木犀草苷进样量在0．86―427．4lxg的范围内线性良好。6精密度试验精密吸取对照品溶液(10．26lxg・mL)10L，按上述色谱条件，连续进样6次，测得平均峰面积为934176，RSD为0．71％。结果表明仪器分析的重复性良好。7供试品溶液的稳定性精密吸取供试品溶液(批号20070401)10lxL，分别于0，3，6，9，12，15，18，24h进样测定，测得样品中木犀草苷的平均峰面积(n：8)为326649，RSD为1．2％。结果表明，供试品溶液在24h内稳定。8重复性试验取同一批次(批号20070401)的供试品约0．5，1，1．5g，精密称定，按“2．1．2”项下方法制备供试品溶液，进行含量测定。木犀草苷含量的平均值为0．057％，RSD为1．4％。结果表明此法重复性良好。9回收率试验取同一批已知含量(批号20070401)的样品(过4号筛)0．5g，共9份，每3份为一组，每组分别精密加人对照品溶液(427．4lxg・mL)1．6，2．2，2．8mL。按“2．1．2”项下方法制备所需溶液，在上述色谱条件下进行含量测定，计算回收率(n=3)。结果木犀草苷低、中、高3种浓度的回收率分别为98．50％，99．37％，102．76％；RSD分别为0．69％，0．16％。0．15％。10样品测定取不同产地的7批样品各2份，按“2．1．2”项下方法制备供试品溶液，按上述色谱条件每份溶液分别进样2次，进行测定，按外标法计算，结果见表1。

采用高效液相色谱法测定金银花不同部位(花,叶,茎的表皮和茎)中木犀草素及其苷的含量.应用AglientZorbaxSB-C18色谱柱,以甲醇(φ甲醇=0.02%)-磷酸溶液(φ磷酸=50%)为流动相测定木犀草素,以乙腈(ρ乙腈=0.5%)(A)-冰醋酸溶液(B)按VA∶VB=1∶9,梯度洗脱至3∶7为流动相测定木犀草苷,流速0.3mL/min,柱温30℃,检测波长350nm.分析结果表明:木犀草素存在于金银花的花,叶和茎的表皮中;木犀草苷存在于金银花的花和叶中.该方法操作简便、结果准确、专属性强,可用于金银花植物中木犀草素及苷的含量测定.