如何设计基因cds序列的pcr引物
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解决时间 2021-12-18 03:48
- 提问者网友：人走茶凉
- 2021-12-17 07:49
如何设计基因cds序列的pcr引物
最佳答案
- 五星知识达人网友：盏茶作酒
- 2021-12-17 08:49
提取细胞总RNA然后用试剂盒反转录成cDNA，用cDNA作为模板扩增基因的CDS区，然后想要转染进细胞中。比如MYOD1基因，首先在NCBI找到它的mRNA序列，然后找到它的CDS序列，全部复制下来，在primer 5.0 中。正向引物直接从CDS的第一个核酸开始（比如18bp），反向引物从CDS最后一个核酸开始，向前选择序列（比如17bp），调节2个引物的长度（不一定要一致），尽量避免错配，二聚体，产生错的产物即可。最后在引物的5‘端添加酶切位点以及保护碱基。
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- 1楼网友：会挖宝的小仙女
- 2021-12-17 09:20
我不会~~~但还是要微笑~~~：）
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