为什么我的小鼠脑部冰冻切片全是洞呀，谁能救救我

为什么我的小鼠脑部冰冻切片全是洞呀，谁能救救我

据我了解，应该是你脱水不充分，导致水残留，冰冻时候水形成结晶，融化后变成空洞。一般较大组织建议梯度脱水，先10%脱水，下沉后在转入15%，最后30%。我自己用的小鼠，直接30%，不过我用的溶液量较大。未发现空洞。个人经验，仅供参考。

我一直做冰冻切片，尼氏染色，你所说的问题根源在于固定液和蔗糖液配置，一定要用PH7.4 PBS配置固定液和蔗糖液。用非PBS固定和沉糖会破坏膜结构，所以是造成空洞状的根源。另外在冰冻切片时，要掌握好温度，不易过低或过高，靠经验（可以拿普通鼠做）积累好技术，再做转基因鼠切片。