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microRNA的荧光定量PCR茎环法和加尾法的引物不同吗

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解决时间 2021-02-14 07:28
microRNA的荧光定量PCR茎环法和加尾法的引物不同吗
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因为你的CDNA中可能混有DNA,跨内含子设计引物是为了避免DNA中的片段被扩增出来影响实验结果
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原理不同:荧光定量pcr实时监测与dna结合的荧光染料激发的荧光;引物长度,20bp;tm值可以设置在55度(实验的时候可以用60度退火,两条引物的退火温度不要相差大于2度);产物长度,100-150bp(如果没有合适的引物,产物长度可以设置在80-200)。
荧光定量pcr是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对pcr产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。
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