一般做细胞侵袭转移实验研究，细胞凋亡率不能超过百分之多少

一般做细胞侵袭转移实验研究，细胞凋亡率不能超过百分之多少

细胞凋亡检测可以：（1）用于肿瘤细胞和组织在内的不同种类病理标本研究；（2）应用于临床诊疗，新药研制、生物制品开发、肿瘤放化疗、以及从促凋亡角度探索肿瘤的基因治疗；（3）对相关疾病的早期发现、放化疗的疗效评价具有举足轻重的地位。
荧光探针双标记法
实验原理
本实验用1μg/ml 三尖杉酯碱HT在体外诱导培养的HL-60细胞发生凋亡，同时也有少数细胞发生坏死。用Hoechst33342和碘化丙啶（propidium iodide，PI）对细胞进行双重染色，可以区别凋亡、坏死及正常细胞。

三尖杉酯碱（HT）是我国自行研制的一种对急性粒细胞白血病，急性单核白血病等有良好疗效的抗肿瘤药物。研究表明HT在0.02~5μg/ml范围内作用2小时，即可诱导HL-60细胞凋亡，并表现出典型的凋亡特征。

细胞膜是一选择性的生物膜，一般的生物染料如PI等不能穿过质膜。当细胞坏死时，质膜不完整，PI就进入细胞内部，它可嵌入到DNA或RNA中，使坏死细胞着色，凋亡细胞和活细胞不着色。而一些活细胞染料由于为亲脂性物质，可跨膜进入活细胞，因而可进行活细胞染色。Hoechst33342是一种活性荧光染料且毒性较弱，它是双苯并咪唑的一种衍生物。与DNA特异结合（主要结合于A-T）碱基区），显示凋亡细胞和活细胞。凡是看到有凋亡小体的细胞都是凋亡细胞。
实验材料
人早幼粒白血病HL-60细胞
试剂/试剂盒
三尖杉酯碱 Tris-Hcl EDTA缓冲液 碱性裂解液 SDS 醋酸钠 异丙醇 乙醇 溴酚蓝 蔗糖指示剂 TBE电泳缓冲液 琼脂糖 溴乙锭 PI母液 Ho33342母液
仪器/耗材
荧光显微镜 电泳仪 电泳槽 微量加样器 离心管 载玻片 盖玻片

一般是利用噬菌体来做，没有特殊要求的话就是利用荧光标记标记噬菌体然后让他去侵染细胞，同时做观察