如何用pcr测未知基因的序列

以前没有学过分子生物学 希望能用通俗的话解释 还有想问下1 pcr有什么应用
2从提取rna 到cDNA 在进行pcr 之后还能进行什么 3我所测得基因序列是未知的，是不是在设计引物时只能找亲缘相近的 那我pcr之后得到的基因序列 又不能确定是不是我想要的 这又该怎么办呢？ 谢谢了

PCR是用来扩增目的片段的，可以富集你想要的片段然后用来测序或者克隆基因，可以在这个片段上做点突变，甚至可以用来测定目的片段在原始模版当中的丰度（包括有无）。
cDNA除了进行PCR，也可以用来做cDNA文库
第三个问题完全听不懂，不知道你的基因未知到什么程度，如果你完全不知道他的序列，你怎么确定他是一个什么基因，跟什么比较接近，又怎么设计引物呢，不清楚你要的是个什么标准。测序的话都是用TA克隆将PCR产物克隆到质粒上，拿单克隆去测的。这样测序不需要特异性引物。

提取细胞总rna然后用试剂盒反转录成cdna，用cdna作为模板扩增基因的cds区，然后想要转染进细胞中。比如myod1基因，首先在ncbi找到它的mrna序列，然后找到它的cds序列，全部复制下来，在primer 5.0 中。正向引物直接从cds的第一个核酸开始（比如18bp），反向引物从cds最后一个核酸开始，向前选择序列（比如17bp），调节2个引物的长度（不一定要一致），尽量避免错配，二聚体，产生错的产物即可。最后在引物的5‘端添加酶切位点以及保护碱基。