永发信息网

基因克隆的具体操作步骤是什么?

答案:1  悬赏:70  手机版
解决时间 2021-08-15 05:56
基因克隆的具体操作步骤是什么?
我是学生物的,可是我对生物一窍不通,现在要做毕业试验了.题目是《高温灵菌红素产生菌的基因克隆与鉴定》.我的老师说引物序列已经设计好了,我的任务就是进行相关基因的克隆,可是我还是不知道怎么克隆,
最佳答案

你好,我现在也正在做分子克隆,与你共勉~分子克隆选择目的基因,并设计相应引物;(你现在已经有了)用引物PCR扩增目的基因片段;选择合适(抗性标记、酶切位点等)的克隆载体(为了保真扩增),并将PCR片段连接入克隆载体中;(一般用Taq酶的PCR产物在末尾会自带一个A,可在Solution 1作用下与两端各带一个T的线性T载体直接相连)将连接产物转化入感受态大肠杆菌,使之在含有抗生素的培养基上生长扩增;从大肠杆菌中提取质粒(即前面的连接产物),酶切鉴定和测序鉴定均无误后将目的基因片段切下并与新的表达载体连接,然后再次转化入大肠杆菌中扩增,再提质粒,即得到想要的目的基因片段克隆. 注意克隆载体和表达载体的区别,克隆载体可大量扩增而不能表达,表达载体可表达成蛋白但复制的数量少,因此先用克隆载体大量扩增,再连入表达载体中用于实验.相同点式两种载体都是质粒.
我要举报
如以上问答信息为低俗、色情、不良、暴力、侵权、涉及违法等信息,可以点下面链接进行举报!
大家都在看
性开头氏结尾的词语有哪些
《阿拉伯超好男声》 歌词
Vista玩游戏
佳睿是什么意思名字上,鸾和鸢哪个字用在名字
中国教育工会仙居县淡竹乡中心学校委员会地址
为什么一到晚上电脑就出问题
关于超声波测距模块
领导错了怎么办,在酒桌上有什么规矩,需要注
天龙2.70小逍遥,全7.8手工,全555石头.怎么
宠物改版后恶心死了,怎么回到以前的版本啊,
汝州市平顶山鸿运旅馆地址有谁知道?有点事想
把他揪出来什么意思,找骗子,怎么把他揪出来
我后悔 那天 ,没一走了之 、用英语怎么说 ?
台电TL-C430+无法充电,数据线没问题,怎么办
跪求 QQ旋舞名字
推荐资讯
村里开失业证明怎么写,开单身证明,村里证明
关于龙之谷任务问题
教育局有规定没开学之前不可以退学么?
我的显示器是不是被修理者换过了???急
遂平县驻马店遂平县第二中学地址在哪里啊
是不是越受欢迎的越会撒谎?
有什么办法在查找联系人的栏目隐藏自己,让别
在 在文章中用第一 二 三人称有什么好处以及
黄陂区武汉康辉旅游黄陂(横店门市部)地址在哪
求一个猪宝宝。
通许县开封来福康大药房(通许嘉信医院西南)地
早安女人正能量句子,早安正能量语录
正方形一边上任一点到这个正方形两条对角线的
阴历怎么看 ?