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做免疫荧光出现了细胞核外的非特异性染色,是怎么回事

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解决时间 2021-02-18 09:50
做免疫荧光出现了细胞核外的非特异性染色,是怎么回事
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如果你的片子和操作过程都是一样,而一组没信号、另一组却有信号,那出现差异的原因就应该是一抗的反应过程(不知你的显色过程是怎样的);而你要是能确定看到的结果不是基因表达的实际情况,即你所说的非特异染色,那就应该是抗体的原因,单就非特异染色而言,可能是你的抗体稀释度不够,可以尝试倍增稀释比,最好是查询使用与你用相同抗体的相关文献的稀释比,或直接咨询公司的技术支持;另外一个原因可能是你的抗体不好使,由于你的另一组抗体没有提供阳性信号,致使你的体系没有可靠的对照,建议你选择一个阳性对照,比如肿瘤中常用的ki67,这样可以知道你的操作步骤是否存在问题。
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