是不是含有半胱氨酸的多肽都具有还原性?
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解决时间 2021-11-24 12:28
- 提问者网友:回忆在搜索
- 2021-11-23 19:51
是不是含有半胱氨酸的多肽都具有还原性?
最佳答案
- 五星知识达人网友:孤老序
- 2021-11-23 19:58
本人在表达一个多肽(一种抗菌肽),成熟肽只有26个AA,所以采用了三个重复片段串联表达,问题是26个AA中有8个半胱氨酸,三个重复片段90个AA中就有24个C,中间加上羟胺的识别位点,可以纯化后化学方法切割成单体。
目前我试过真核表达(毕赤酵母SMD1168 ,表达载体Invitrogen pPizaA 3.5k),原核表达:表达载体 PET28,PET-HIS, 表达菌株有BL21(DE3 ),Rosseta(DE3)
都没有表达,做了好几个月了,都抓狂了!!!!
我分析是半胱氨酸含量太高所致,导师说不排除抗菌肽的毒性作用,主要是还得接着往下做!! 请教大家有没有在表达载体,菌株,或是方法上好的建议或者帮我分析表达不出来的愿意也可以啊 ,麻烦大家了 呵呵
目前我试过真核表达(毕赤酵母SMD1168 ,表达载体Invitrogen pPizaA 3.5k),原核表达:表达载体 PET28,PET-HIS, 表达菌株有BL21(DE3 ),Rosseta(DE3)
都没有表达,做了好几个月了,都抓狂了!!!!
我分析是半胱氨酸含量太高所致,导师说不排除抗菌肽的毒性作用,主要是还得接着往下做!! 请教大家有没有在表达载体,菌株,或是方法上好的建议或者帮我分析表达不出来的愿意也可以啊 ,麻烦大家了 呵呵
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