10微升pcr标准体系
答案:3 悬赏:70 手机版
解决时间 2021-11-11 16:26
- 提问者网友：送舟行
- 2021-11-11 13:27
10微升pcr标准体系
最佳答案
- 五星知识达人网友：醉吻情书
- 2021-11-11 13:36
这个不是一概而论的
也没有所谓的标准可言
模板浓度不一样就可造成其他所有成分的不一样
不同的引物不同的退火温度不同的量
建议做PCR之前先优化体系
可建一正交试验表
确定各组分的最佳组合
也没有所谓的标准可言
模板浓度不一样就可造成其他所有成分的不一样
不同的引物不同的退火温度不同的量
建议做PCR之前先优化体系
可建一正交试验表
确定各组分的最佳组合
全部回答
- 1楼网友：琴狂剑也妄
- 2021-11-11 14:54
那个和你用的试剂有关啊，dNTP浓度，模板引物浓度，模板种类（比如扩增小麦基因组就可以把模板浓度提高到拟南芥的10倍），引物特异性，buffer里有没有镁离子，tap酶质量等等都有影响。不好说啊
- 2楼网友：旧脸谱
- 2021-11-11 14:48
我原来做过的优化体系：
双蒸水 5.75
10×buffer 1
Mg2+ 0.6
dNTP 0.8
Primer1 0.4
Primer2 0.4
DNA模板 1
Taq酶 0.05
双蒸水 5.75
10×buffer 1
Mg2+ 0.6
dNTP 0.8
Primer1 0.4
Primer2 0.4
DNA模板 1
Taq酶 0.05
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