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下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。

答案:2  悬赏:70  手机版
解决时间 2021-01-27 05:41
下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答:

(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用 限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因,然后在 酶的作用下构建重组载体。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含 的培养基上进行。
(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是 。
A.启动子          B.tetR C.复制原点 D.ampR
(3)过程①可采用的操作方法是 。
A.农杆菌转化 B.大肠杆菌转化
C.显微注射 D.细胞融合
(4)过程②采用的生物技术是 。
(5)为检测人乳铁蛋白是否成功表达,可采用 技术。
A.核酸分子杂交 B.基因序列分析
C.抗原—抗体杂交 D.PCR(除指定空外每空 1 分,共8分)
最佳答案
(答案→)(除指定空外每空 1 分,共8分) 解析:(1)由图可知目的基因和质粒上都有BamHI和HindIII酶切位点,因此应用它们切割,切割后需要将目的基因和运载体用DNA连接酶进行连接,因为该质粒上有抗氨苄青霉素的抗性标记基因,因此应放在含氨苄青霉素的培养基中进行培养以便筛选。(2)基因的表达主要是转录和翻译,启动子是驱动基因进行转录的,故应是A。(3)因为是要导入到动物细胞中,故最常用显微注射法,故C正确。农杆菌转化法是将重组载体导入到植物中常用的方法,故A错误。大肠杆菌转化法是导入到微生物细胞常用的方法,故B错误。细胞融合是细胞工程技术。(4)将早期胚胎移入到代孕牛体内应用胚胎移植。(5)检测蛋白是否表达,可以用抗原抗体杂交,故C正确。
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