荧光显微镜下观察细胞，用什么染色方法

荧光显微镜下观察细胞，用什么染色方法

1. 染色是提高标本显微观察效果的关键措施：：
2.  由于活体的微生物个体的颜色在显微镜下差别很小，同时所观察样本中所含的微生物种类繁多，个体微小，形态千差万别。每一种的组织结构、内含物质复杂多变，相互间交织贯穿在一起。如果不加染色显然是很难在显微镜的视野中把它们相互区别出来。
3. 正是因为这样，由于标本内部的微生物种类、形态、组织结构、物质大分子的成分染色剂的化学反应（着色）各有不同。通过染色，它们之间就会形成各自不同的颜色梯度，从而产生不同的视觉对比度。这样便有利于在显微镜下把它们的个体形态、着色差别、内含物、组织结构区分出来。所以大多数的标本都需要染色才能更好地在显微镜进行下观察。
4. 染色是制作永久标本的必须步骤和措施：
5. 在制作永久保存标本时，必须对标本进行固定和染色，通过固定和染色才能把标本的外部形态和内部结构层次永久固定下来，使之得以长久保存不分解变质。
6. 不是所有的观察标本都需要染色：
7. 染色的标本虽然能够增加标本的色度和色差，但在固定、染色过程中由于化学作用的缘故，也会使一些内部物质的形态和分子结构发生变性而失真，从而影响观察的真实性。再者，一些活体观察是不需要或不能使用染色剂的。

首先，你需要确定你想观察细胞的什么东西。你只想把细胞染亮的话，用calciem am，染核的话用dapi或者hoescht33342，染死细胞核的话用pi，染线粒体，内质网，endosome，actin等都有自己的染料。 然后，你根据不同的染料的说明配制溶液，养细胞，有些染料很快，比如dapi染细胞核就是分分钟的事情，有的染料要慢一些，那么就要多养一会儿。 如果你用荧光显微镜看，你首先要确定你的荧光显微镜可以用来看细胞，一般看哺乳动物细胞的显微镜是倒置的，如果你的显微镜是正置的，操作会比较麻烦。然后你要确定你的显微镜的激发光可以激发你要用的染料，比如，有的显微镜没有紫外光，那么就不能用dapi染细胞核。 如果你这些搞清楚了，你能正确操作显微镜，那么你就可以上镜去看了，注意，在荧光显微镜下，染料可能被淬灭掉，所以有些染料，你看得时候要快一点。