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如何使淋巴细胞分离液密度梯度离心后分离的细胞层明显清晰

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解决时间 2021-02-13 03:38
如何使淋巴细胞分离液密度梯度离心后分离的细胞层明显清晰
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把你要分离的细胞混合液慢慢的滴加到淋巴分离液上,最好沿着离心管壁流下,离心机的上升和下降都要选择最慢加速度,因为淋巴分离液是根据单核细胞、红细胞和其他细胞的密度分离开的,这几种细胞的密度本来就相差不大,所以一定要慢。如果离心结束后,中间有一层薄薄的白色细胞层,那就是单核细胞,离心管轻拿轻放,切忌过猛。
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两者都是依靠离心力对细胞匀浆悬浮扔中的颗粒进行分离的技术。差速离心是一种较为简便的分离法,常用于细胞核和细胞器的分离。因为在密度均一的介质中,颗粒越大沉降越快,反之则沉降较慢。这种离心方法只能将那些大小有显著差异的组分分开,而且所获得的分离组分往往不很纯;而密度梯度离心则是较为精细的分离手段,这种方法的关键是先在离心管中制备出蔗糖或氯化铯等介质的浓度梯度并将细胞匀浆装在最上层,密度梯度的介质可以稳定沉淀成分,防止对流混合,在此条件下离心,细胞不同组分将以不同速率沉降并形成不同沉降带。
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