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检测目的基因是否导入和是否插入分别用什么方法?

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解决时间 2021-04-05 21:00
检测目的基因是否导入和是否插入分别用什么方法?
最佳答案
检测目的基因是导入到载体中常用抗性培养基进行分离,因为载体中必需含有可用于筛选的抗性基因。
检测外源DNA是否导入宿主细胞可以采用核酸杂交法。
全部回答
基因枪法
用酶切鉴定。
正确的问题应该是:检测载体是否转入和外源基因是否插入分别用什么方法?
检测载体是否转入一般利用载体上的标记进行检测:
大多数是抗性基因,如:1、氨苄抗性;2、四环素抗性;3、氯霉素抗性;4、新霉素抗性等。
检测外源基因是否插入一般利用载体上被插入位点的另外一个基因是否正常表达来检测,正常表达,说明没有插入,未正常表达说明插入了,破坏了原来的基因:
如:1、B-半乳糖苷酶的a互补蓝白斑筛选;2、抗性基因筛选。
还可以利用质粒的提取电泳检测:质粒有无检测载体是否转入,质粒是否比空载质粒大检测外源基因是否插入。
关于这个问题,是否是询问外源基因是否导入宿主细胞和外源基因是否插入(整合)到宿主基因组中的检测方法?
检测是否导入,简单的方法可通过PCR方法检测,针对该基因设计特异性引物进行PCR扩增,检测样本若有目的条带则一般认为该基因已经导入宿主细胞。
检测基因是否已插入,则需要提取基因组进行测序,以测序结果进行比对,判断基因是否插入到了宿主基因组中。
希望能帮到你
导入和插入有区别吗?应该都是DNA分子杂交吧追问我也觉得是啊!
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