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急,初级菜鸟问个问题:真菌 目的基因的获取,是抽取RNA用RT-PCR,还是直接抽取DNA PCR呢?

答案:3  悬赏:60  手机版
解决时间 2021-02-17 20:17
急,初级菜鸟问个问题:真菌 目的基因的获取,是抽取RNA用RT-PCR,还是直接抽取DNA PCR呢?
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如果该基因没有内含子,可以直接用DNA作模板进行PCR。如果该基因有内含子,就必须用RNA进行RT-PCR,否则得到的目的基因可能无法表达。追问不知是否可以这样理解:如果有内含子,导入真菌中,同一个菌种可以直接PCR。而在不同的菌种,内含子会影响目的基因的表达,所以需RT-PCR?追答  你不用想那么复杂,是我说得不够直接。
  简单来说,目的基因中不能有内含子,否则可能无法表达。想获得没有内含子的目的基因,最好的办法是RT-PCR。但是,如果该基因本来就没有内含子,那么用基因组DNA直接做PCR也可以。
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这得看你要用目的基因干嘛了.如果想要导入到真核细胞,要用直接抽取的方法,如果导入到原核细胞的话就要用mRNA逆转录了。
真核生物的基因组是DNA,但是真核生物的基因含有大量的非编码区,称为内元(intron),真正编码蛋白的区段是被这些内隔开的,这些编码区叫做外元(exon)。真核生物的DNA转录成为RNA之后,经过剪切和拼接,去掉这些非编码区,才形成成熟的mRNA,由mRNA再翻译成蛋白质。
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