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感受态细胞的浓度多大合适

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解决时间 2021-02-20 18:19
感受态细胞的浓度多大合适
最佳答案
两种质粒是可以同时进入同一个感受态细胞的,比如构建腺病毒载体时。但是要求两种质粒进入同一个感受态细胞,转化效率非常低,一般需要电转或者其他的特殊处理。由于质粒的不兼容性,拥有同种复制子的质粒不能在同一细胞内稳定共存,经过几代的复制,会质粒丢失,所以并不是任何两个或两个以上质粒都可以在同一细胞内稳定存在,但是可以同时进入。
全部回答
1、将培养液转入离心管中,冰上放置10分钟,然后于4℃下3000g离心10分钟。 2、 弃去上清,用预冷的0.05mol/l的cacl2 溶液10ml轻轻悬浮细胞,冰上放置15-30分钟后,4℃下3000g离心10分钟。 3、弃去上清,加入4ml预冷含15%甘油的0.05mol/l的cacl2 溶液,轻轻悬浮细胞,冰上放置几分钟,即成感受态细胞悬液。 4、 感受态细胞分装成200μl的小份,贮存于-70℃可保存半年。
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