基因工程操作中，用的三个限制酶(一个切割质粒，两个切割目的基因)都可以不同吗，也就是可以是三种吗？

基因工程操作中，用的三个限制酶(一个切割质粒，两个切割目的基因)都可以不同吗，也就是可以是三种吗？

标题的理解不对。
限制酶切基因的目的是为了露出相匹配的单链末端，即切割后目的基因的一个末端会和质粒的末端相匹配，就可以连起来，而为了获得相匹配的末端则需要同一种限制酶。
所以，如果用一个限制酶切质粒的话，目的基因的两端都要和质粒末端相匹配，切目的基因的限制酶也是那一个，就是一种限制酶。
如果用两个限制酶切质粒的话，目的片段的两端分别是2种相匹配的，需要用2种限制酶切。就是总共2种限制酶。不存在标题的情况。

识别序列有区别--g↓gatcc--限制酶1,2都可以切，但是--↓gatc--只能有酶2切。懂了么，就是说酶一要识别出6个碱基这样的排序才能切，但是酶二只需要识别出4个这样的排序，酶二的选择性比较低。然后，请给我题目里的那张图~是否在标记基因中存在gatc的序列呢，如果有，酶二会去把他切断，所以就会破坏标记基因了。 求采纳为满意回答。