Western Blotting，我做了个His-tag的蛋白，大概11KDa大，怎么做出的Western有好几条带，明显的大很多？
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解决时间 2021-02-17 10:19
- 提问者网友：疯子也有疯子的情调
- 2021-02-16 17:15
Western Blotting，我做了个His-tag的蛋白，大概11KDa大，怎么做出的Western有好几条带，明显的大很多？
最佳答案
- 五星知识达人网友：有你哪都是故乡
- 2021-02-16 17:50
非特异性吧~
不能排除封闭和抗体的问题
现在的温度封闭一个小时怕不够，我们实验室用的25℃封闭2h，一般没有非特异性，封闭用的是牛奶和TBST
不好的抗体容易出非特异性，以前出现过这种情况，换抗体就好了
不能排除封闭和抗体的问题
现在的温度封闭一个小时怕不够，我们实验室用的25℃封闭2h，一般没有非特异性，封闭用的是牛奶和TBST
不好的抗体容易出非特异性，以前出现过这种情况，换抗体就好了
全部回答
- 1楼网友：夜风逐马
- 2021-02-16 19:30
传的追问你是说被污染了吗？我有做阳性对照，阳性对照本来没有这些条带的也有了。不过那个阳性对照是粗提产物，放了一周左右，有人说是不是被降解了。
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