免疫沉淀结合western blot和免疫共沉淀研究蛋白互作的区别

免疫沉淀结合western blot和免疫共沉淀研究蛋白互作的区别

不知道你所说的ProteinA / Protein G 是偶联了beads的吗? 如果是：用来结合抗体的. 如果不是：一般用来在加入抗体之前的封闭,当然也可以用来结合抗体的.

不影响，因为蛋白沉淀可能是因为蛋白浓度过高，导致蛋白聚集，变性，或结构改变引起沉淀，而做wb前要加sds上样缓冲液，并煮沸，目标是为了让蛋白彻底变性，sds作为一种去污剂，也可以增加蛋白的溶解度，最后离心，会取溶解的部分去上样的。 而且如果加入loading以后，可能会发现，沉淀反而变少了，就是因为一部分沉淀的蛋白被溶解了。